Бүтээгдэхүүн

5-фторурацил (5-FU) ба хоёр эндоген монофосфатын нуклеотидын хэд хэдэн метаболитыг тусгайлан тодорхойлохын тулд бид шингэн хроматографи-тандем масс спектрометр (LC-MS/MS) дээр суурилсан анхны аргыг боловсруулсан.Энэхүү шинжилгээ нь: (i) 5-FU эсвэл 5-фтор-2′-дезоксиюридин (5-ФдУрд)-аас 5-фтор-2′-дезоксиюридин-5′-монофосфатын (5-FdUMP) эсийн доторх нийлэгжилтийг тодорхойлох боломжийг олгосон. , (ii) эсийн доторх 2′-дезоксиуридин-5′-монофосфат (dUMP)/тимидин-5′-монофосфатын (TMP) харьцаанд 5-FdUMP концентрацийн үзүүлэх нөлөө, (iii) 5-FdUMP-ийн шүүрлийн хэмжээ ба ABC тээвэрлэгчээр хүний ​​өсгөвөрлөсөн эсээс 5-FU.Бидний туршилтын нөхцөлд эсүүдийг 5-FU эсвэл 5-FUrd-ээр өсгөвөрлөсөн.Дараа нь эсийн уургийг метанолоор тунадасжуулсан.Энэ процедур нь олборлолтын өндөр сэргэлтийг хангасан.Нэмж дурдахад, эсээс 5-FU болон 5-FdUMP шүүрлийг хэмжихийн тулд бид эдгээр молекулуудын хэмжээг өсгөвөрлөх орчинд хийсэн.Хэвлэл мэдээллийн хэрэгслийг шууд тарьсан (5-FU) эсвэл Oasis Wax олборлох хайрцаг (5-FdUMP) ашиглан хатуу фазын олборлолтоор хийсэн.Шинжлэх бодисыг салгах ажлыг dC18 Atlantis 3.5 μm, (100 мм × 2.1 мм id) баганад изократ горимтой аммонийн форматын буфер/метанол/ус (5/5/90, v/v)-ийг хөдөлгөөнт фаз болгон ашигласан.Ажиллах хугацаа 6.2 минутаас хэтрэхгүй.Шинжлэх бодисыг сөрөг ионы горимд цахилгаан шүрших интерфэйсээр ионжуулсан.Бид нэгдлүүдийн дагуу 2.5-150 нг мл-1-ийн хүрээнд аргыг баталгаажуулсан.Долоон өдрийн турш шинжилгээний дотор болон хоорондын хэлбэлзэл 10%-иас бага байв.Дээжийг −20 хэмд дор хаяж хоёр долоо хоног, хөлдөөх гэсэлтийн гурван мөчлөгийн дараа хадгалахад бүх нэгдлүүд эсүүд эсвэл өсгөвөрлөх орчинд тогтвортой байсан.Хоёр хэвлэл мэдээллийн хэрэгсэлд матрицын нөлөө ажиглагдаагүй.