Бүтээгдэхүүн

Трис ацетатын давсыг TAE (Tris-acetate-EDTA) буфер бэлтгэхэд ихэвчлэн ашигладаг бөгөөд үүнийг ажиллаж байгаа буфер болон агароз гель болгон ашигладаг.Tris Acetate-EDTA буферийг ДНХ-ийн агароз гель электрофорез хийхэд ашигладаг боловч денатургүй РНХ-ийн агароз гель электрофорез хийхэд ашигладаг.Давхар хэлхээтэй ДНХ нь бусад буфертэй харьцуулахад TAE-д илүү хурдан ажиллах хандлагатай байдаг бөгөөд уртасгасан электрофорезийн үед шавхагдаж болно.Өргөтгөсөн электрофорезийн үед буферийн эргэлт эсвэл буфер солих нь доод буферийн багтаамжийг арилгах боломжтой.Уусмал дахь ДНХ-ийн хөдөлгөөнийг судлахын тулд янз бүрийн концентрацид хэрэглэж болно.TBE буфер (Tris-Borate-EDTA Buffer, 10X Powder Pack, sc-296651) дахь борат нь олон ферментийн хүчтэй дарангуйлагч тул ДНХ-ийн дээжинд зориулсан ферментийн хэрэглээг үзэхэд TAE буфер хэрэглэхийг зөвлөж байна.Трис ацетат давс нь мөн галт люциферазатай ATP шинжилгээнд өндөр мэдрэмжтэй буфер юм.

Хэрэглээ: TAE ажиллаж байгаа буфер нь ДНХ-ийн агароз гель электрофорез хийхэд хамгийн түгээмэл хэрэглэгддэг буфер бөгөөд уугуул РНХ-ийн агароз гель электрофорезид мөн ашиглагддаг.Давхар хэлхээтэй ДНХ нь бусад буфертэй харьцуулахад TAE-д илүү хурдан хөдөлдөг боловч удаан үргэлжилсэн электрофорезийн үед буферийн ионууд шавхагдсаны улмаас сэлж чаддаггүй.Урт хугацааны электрофорезийн үед буферийн эргэлт эсвэл буфер солилцоо нь доод буферийн багтаамжийг нөхөж чаддаг.2 Төвлөрсөн TAE буферийг шингэлж 40 мм Трис ацетат ба 1 мм EDTA, рН 8.3 агуулсан 1 mMTAE буфер авна.1 mMTAE буферийг агароз гель болон ажиллаж байгаа буфер болгон ашиглаж болно.Хамгийн их нарийвчлалтай байхын тулд хэрэглэсэн хүчдэл 5V/см-ээс бага (нэгж электродуудын хоорондох зай) байхыг зөвлөж байна.

Хэрэглээ: TAE ажиллаж байгаа буфер нь Chemicalbook гель дэх ДНХ-ийн агароз гель электрофорез хийхэд хамгийн түгээмэл хэрэглэгддэг буфер бөгөөд мөн денатуржуулдаггүй РНХ агароз гель электрофорез хийхэд ашиглагддаг.Давхар хэлхээтэй ДНХ нь бусад буфертэй харьцуулахад TAE-д илүү хурдан хөдөлдөг боловч удаан үргэлжилсэн электрофорезийн үед буферийн ионууд шавхагдсаны улмаас сэлж чаддаггүй.Урт хугацааны электрофорезийн үед буферийн эргэлт эсвэл буфер солилцоо нь доод буферийн багтаамжийг нөхөж чаддаг.Төвлөрсөн TAE буферийг шингэлж 40 мМ Tris ацетат ба 1 мм EDTA, рН 8.3 агуулсан 1 mMTAE буфер авсан.1 mMTAE буферийг агароз гель болон ажиллаж байгаа буфер болгон ашиглаж болно.Хамгийн их нарийвчлалтай байхын тулд хэрэглэсэн хүчдэл 5V/см-ээс бага (нэгж электродуудын хоорондох зай) байхыг зөвлөж байна.

Хэрэглээ: ATP-ийг галын люциферазагаар илрүүлэхэд энэ бүтээгдэхүүн нь хамгийн мэдрэмтгий буфер юм;глутамат холбох илрүүлэх.

[3H]l-глутамины хүчлийг рецепторын бус материалтай холбодог.

[3H]L-глютамины хүчлийн микрофюгийн хоолой, шилэнд холбогдохыг дөрвөн буферт судалсан.Эдгээр материалтай суурь холболт нь бага байсан боловч Tris-HCl болон Tris-citrate буферт центрифуг хийх эсвэл сорох замаар нэмэгдсэн.Оронд нь HEPES-KOH, эсвэл Tris-acetate буфер ашигласан үед энэ холболт хамаагүй бага байсан.[3H]L-глутаматыг микрофюгийн хоолойд холбохыг L- харин глутамат ба аспартатын D-изомерууд дарангуйлдаггүй.DL-2-amino-7-фосфоногептанойн хүчил мөн холболтыг дарангуйлдаггүй.Бага ба дунд зэргийн дарангуйлал үзүүлсэн бусад нэгдлүүд нь: N-метил-D-аспартат, квисвалат, L-глутамины хүчлийн диэтил эфир, N-метил-L-аспартат, кайнат, 2-амин-4-фосфонобутират.Холболт нь денатуратлагдсан хархны тархины мембранаар дарангуйлагдсан.Трис-ацетатын буферт холбосон үед дахин дахин хөлдөөж гэсгээсэн мембраны бэлдмэлээр уураг хамааралтай [3H] глутаматыг холбосон.Трис-ацетат эсвэл HEPES-KOH буферийг глутаматтай холбогчийг тодорхойлох шинжилгээнд ашиглахыг зөвлөж байна.Хэрэв Tris-HCl эсвэл Tris-citrate буфер хэрэглэж байгаа бол микрофюгийн хоолой эсвэл шилэн шилэн шүүлтүүрт холбогдохыг засахын тулд зохих хяналтын туршилтыг хийх хэрэгтэй.