Бүтээгдэхүүн

LecA (PA-IL) нь Pseudomonas aeruginosa-аас үүссэн цитотоксик лектин ба адгезин бөгөөд гидрофоб галактозидуудыг өндөр өвөрмөц, ойр дотно холбодог.lecA-egfp орчуулгын хайлуулж, биофильмийн эсийн гаднах матрицын иммуноблотын шинжилгээг ашиглан бид lecA нь био хальсаар ургуулсан эсүүдэд илэрдэг болохыг харуулж байна.Полистирол болон зэвэрдэггүй ган дээр хийсэн статик био хальсны шинжилгээнд lecA-ийн мутацын улмаас био хальсны гүн болон гадаргуугийн хамрах хүрээ багасч, LecA-ыг хэт их үүсгэдэг PAO-P47 омог нэмэгдсэн байна.Ган купон дээрх lecA мутант биш PAO-P47 омгийн био хальсны гадаргууг бүрхэх нь изопропил-бета-D-тиогалактозид (IPTG) эсвэл p-нитрофенил-альфа-D-галактозид (IPTG) -ийн аль нэг нь байгаа тохиолдолд өсөлтийг дарангуйлсан. NPG).Цаашилбал, эдгээр гидрофоб галактозидууд байхгүй үед үүссэн гүйцсэн зэрлэг төрлийн био хальсыг IPTG нэмснээр тарааж болно.Үүний эсрэгээр, P. aeruginosa LecB (PA-IIL) лектиктэй өндөр хамааралтай p-nitrophenyl-alpha-L-fucose (NPF) нэмсэн нь био хальс үүсэх, тархалтад ямар ч нөлөө үзүүлээгүй.P. aeruginosa PAO1-ийн планктон өсөлтөд IPTG, NPG эсвэл NPF агуулагдахгүй, омог нь эдгээр сахарыг нүүрстөрөгчийн эх үүсвэр болгон ашиглах боломжгүй байсан нь био хальс үүсэхэд ажиглагдсан нөлөө нь LecA-лигандыг дарангуйлдагтай холбоотой гэж үзэж байна. холбох.Ган купон дээр динамик урсгалын нөхцөлд ургасан био хальсанд ижил төстэй үр дүн гарсан нь LecA нь хүрээлэн буй орчны янз бүрийн нөхцөлд P. aeruginosa био хальсны архитектурт хувь нэмэр оруулдаг болохыг харуулж байна.

Арабидопсисын навчнаас ксилоглюкан олигосахаридын хажуугийн гинжин хэлхээнээс т-фукозилын үлдэгдлийг ялгаруулах чадвартай альфа-L-фукосидаза (EC 3.2.1.51) илэрсэн.Түүнчлэн, ижил төстэй субстратын өвөрмөц шинж чанартай альфа-L-фукозидазыг байцаа (Brassica oleracea) навчнаас цэвэрлэж, SDS-PAGE дээр нэг тууз үүсгэсэн.Энэхүү уургийн хамтлагаас хоёр пептидийн дарааллыг олж авсан бөгөөд эдгээрийг бид AtFXG1 гэж нэрлэхийг санал болгож буй альфа-фукозидазын кодлогч Арабидопсисын генийг тодорхойлоход ашигласан.Нэмж дурдахад альфа-L-фукосидазуудтай ижил төстэй Арабидопсисын ген олдсон бөгөөд бид үүнийг AtFUC1 гэж нэрлэхийг санал болгосон.AtFXG1 ба ATFUC1 хоёулаа Пичиа пасторисын эсүүд болон өсгөвөрлөгч орчинд ялгардаг альфа-L-фукозидазын үйл ажиллагаанд гетерологоор илэрхийлэгддэг.AtFXG1-ээр кодлогдсон альфа-L-фукосидаза нь ксилоглюкан XXFG-ийн олигосахаридын эсрэг, түүнчлэн 2'-фукозил-лактитолын эсрэг идэвхтэй байсан боловч p-нитрофенил-альфа-L-фукопиранозидын эсрэг идэвхтэй биш байв.Гэсэн хэдий ч гетерологоор илэрхийлэгдсэн AtFUC1 нь зөвхөн 2'-фукозил-лактитолын эсрэг идэвхтэй байсан.Тиймээс эхнийх нь ксилоглюканы бодисын солилцоотой холбоотой байх ёстой.