Бидний эргэн тойронд эгэл жирийн мэт боловч үнэн хэрэгтээ тэд бидэнд маш их хувь нэмэр оруулдаг дуугүй олон баатрууд байдаг.Протеиназа К нь молекулын оношлогооны салбарын "дүрсгүй баатар" боловч үйлдвэрлэлийн "том, хүчирхэг"-тэй харьцуулахад протеиназа К нь маш бага ач холбогдолтой тул бид түүний ач холбогдлыг үл тоомсорлож ирсэн.Шинэ титэм тахлын дэгдэлттэй холбоотойгоор протеиназа К-ийн эрэлт хэрэгцээ нэмэгдэж, дотоод болон гадаадад нийлүүлэлт нь хэрэглээнээс хол хоцорч, протеиназа К нь маш чухал гэдгийг бүгд гэнэт ойлгосон.
Протеиназа К-ийн хэрэглээ юу вэ?
Протеиназа К нь уураг задлах ферментийн идэвхжилтэй серин протеаз бөгөөд өргөн хүрээний орчинд (рН (4-12.5), давс ихтэй буфер, 70°С-ийн өндөр температур гэх мэт) үйл ажиллагааг хадгалах чадвартай.Үүнээс гадна, протеиназа К-ийн үйл ажиллагааг SDS, мочевин, EDTA, гуанидин гидрохлорид, гуанидин изотиоцианат гэх мэт дарангуйлдаггүй бөгөөд тодорхой хэмжээний угаалгын нунтаг нь мөн протеиназа К-ийн үйл ажиллагааг сайжруулж болно эмнэлгийн эмчилгээ (вирус, бичил биетний халдваргүйжүүлэлт). ), хоол хүнс (мах зөөлрүүлэх), арьс шир (үс зөөлрүүлэх), дарс хийх (архины тунгалагжуулалт), амин хүчлийн бэлдмэл (муудаж доройтсон өд), нуклейн хүчлийн олборлолт, in situ эрлийзжүүлэх гэх мэт, протеиназа К програмууд байдаг.Хамгийн түгээмэл хэрэглэгддэг хэрэглээ бол нуклейн хүчлийн олборлолт юм.
Протеиназа К нь дээжинд агуулагдах бүх төрлийн уураг, тэр дундаа нуклейн хүчлүүдтэй нягт холбоотой гистонуудыг ферментжүүлэх чадвартай тул нуклейн хүчлүүд дээжээс ялгарч, ханд руу ялгарч, олборлох, цэвэршүүлэх дараагийн үе шатыг хөнгөвчлөх боломжтой.Вирусын нуклейн хүчлийг илрүүлэхэд протеиназа К нь вирусын дээж авах уусмал дахь чухал бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн нэг юм.Proteinase K нь вирусын бүрхүүлийн уургийг хагарах, идэвхгүйжүүлэх чадвартай бөгөөд тээвэрлэх, илрүүлэх үе шатанд илүү аюулгүй байдаг;Үүнээс гадна протеиназа К нь RNase-ийг задлах чадвартай бөгөөд вирусын РНХ-ийн задралаас сэргийлж, нуклейн хүчлийг илрүүлэхэд тусалдаг.
Протеиназа К-ийн нэг өдрийн алдар нэр
Шинжлэх ухааны судалгааны салбарт эсвэл IVD-ийн салбарт нуклейн хүчлийн олборлолт нь хамгийн үндсэн туршилт байдаг тул протеиназа К нь үргэлж маш чухал оршихуй байсаар ирсэн.Гэсэн хэдий ч өмнө нь протеиназа К нь түүний үүрэгээс хамаагүй бага мэддэг байсан.Үүний томоохон хэсэг нь протеиназа К-ийн эрэлт нийлүүлэлтийн харилцаа маш тогтвортой байсантай холбоотой юм.Протеиназа К-ийн нийлүүлэлт нь асуудал болно гэж цөөхөн хүн боддог.
Шинэ титэм тахлын дэгдэлттэй холбоотойгоор нуклейн хүчлийн шинжилгээ хийх эрэлт нэмэгдэж байна.2020 оны 6-р сарын сүүлчээр Хятад улс бараг 90 сая шинэ титмийн туршилтыг хийж гүйцэтгэсэн бөгөөд энэ тоо дэлхийн хэмжээнд улам түгшүүртэй байна.Нуклейн хүчлийг гаргаж авах туршилтанд протеиназа К-ийн ажлын концентраци 50-200 мкг/мл орчим байдаг.Ерөнхийдөө нуклейн хүчлийн дээжийг гаргаж авахад 100 мкг протеиназа К шаардлагатай байдаг.Бодит хэрэглээнд нуклейн хүчлийн олборлолтын үр ашгийг нэмэгдүүлэхийн тулд ихэвчлэн протеиназа К-ийг их хэмжээгээр хэрэглэдэг.Шинэ коронавирусын нуклейн хүчлийг илрүүлэх нь протеиназа К-ийн их хэмжээний эрэлтийг авчирсан.Протеиназа К-ийн анхны эрэлт, нийлүүлэлтийн тэнцвэр хурдан эвдэрч, протеиназа К нь нэг шөнийн дотор тахал өвчнөөс урьдчилан сэргийлэх чухал материал болжээ.
Протеиназа К-ийн үйлдвэрлэлд хүндрэлтэй байдаг
Эпидемийн хөгжлийг дагаад протеиназа К-ийн чухал ач холбогдлыг хүмүүс үнэлдэг болсон ч протеиназа К-ийн хэт бага агууламжаас болж дотоодын цөөн хэдэн компани протеиназа К-ийн үйлдвэрлэлд оролцож байгаа нь ичмээр юм. протеиназа К-ийн үйлдвэрлэлийг бий болгохыг хүсч байна Үйлдвэрлэлийн явцад протеиназа К нь маш онцгой уураг болохыг олж мэдсэн.Протеиназа К-ийн үйлдвэрлэлийн хүчин чадлыг богино хугацаанд өргөжүүлэх нь туйлын бэрхшээлтэй юм.
Протеиназа К-ийг их хэмжээгээр үйлдвэрлэхэд дараах хүндрэлүүд тулгардаг
1. Илэрхийлэл бага
Proteinase K нь ихэнх уургийг өвөрмөц бусаар задалж, экспрессийн эзэн эсэд ноцтой хордлого үүсгэдэг.Тиймээс протеиназа К-ийн илэрхийлэлийн түвшин ерөнхийдөө маш бага байдаг.Протеиназа К-ийг их хэмжээгээр илэрхийлдэг экспрессиональ систем, омгийг шалгах нь ерөнхийдөө илүү урт мөчлөг шаарддаг.
2. Пигмент ба нуклейн хүчлийн үлдэгдэл
Том хэмжээний исгэх нь их хэмжээний пигмент болон эзэн нуклейн хүчлийн үлдэгдлийг нэвтрүүлдэг.Энгийн цэвэршүүлэх процессоор эдгээр хольцыг арилгах нь хэцүү бөгөөд нарийн төвөгтэй цэвэршүүлэх нь зардлыг нэмэгдүүлж, нөхөн сэргээх хурдыг бууруулдаг.
3. Тогтворгүй байдал
Proteinase K нь хангалттай тогтвортой биш, өөрөө ферментжих чадвартай, хамгаалалтын бодисгүйгээр 370С-т удаан хугацаагаар тогтвортой хадгалахад хэцүү байдаг.
4. Тунадасжуулахад хялбар
Протеиназа К-ийн хөлдөөж хатаасан нунтаг бэлтгэхдээ хөлдөөж хатаасан нунтаг дахь протеиназа К-ийн хатуу агууламж их байхын тулд хөлдөөж хатаасан хамгаалалтын бодисыг өндөр концентрацитай нэмэх шаардлагатай. Протеиназа К-ийн концентраци 20мг/мл ба түүнээс дээш бол амархан нэгтгэх нь тунадас үүсгэдэг бөгөөд энэ нь өндөр хатуу агууламжтай протеиназа К-ийг хөлдөөж хатаахад ихээхэн хүндрэл учруулдаг.
5. Их хэмжээний хөрөнгө оруулалт
Proteinase K нь хүчтэй протеазын идэвхжилтэй бөгөөд лабораторид бусад протеазуудыг гидролиз болгож чаддаг.Тиймээс протеиназа К нь судалгаа, боловсруулалт, үйлдвэрлэлийн чиглэлээр мэргэшсэн үйлдвэрлэлийн талбай, тоног төхөөрөмж, боловсон хүчин шаарддаг.
XD BIOCHEM-ийн протеиназа К уусмал
XD BIOCHEM has a mature protein expression and purification platform, and has rich experience in the expression and purification of recombinant proteins and optimization of production processes. Through the rapid formation of a research and development team, the large-scale production process of proteinase K has been overcome. The monthly output of freeze-dried powder is more than 30 KG. The product has stable performance, high enzyme specific activity, and no host cytochrome and nucleic acid residues. Welcome to contact XD BIOCHEM Obtain a trial package (E-mail: sales@xdbiochem.com Tel: +86 513 81163739).
XD BIOCHEM-ийн техникийн шийдлүүд орно
Олон хуулбарт плазмидын интеграцчлалыг ашиглан 8г/л-ийн экспрессийн түвшин бүхий өндөр экспрессийн омгийг сонгосон бөгөөд энэ нь протеиназа К-ийн бага илэрхийллийн түвшний асуудлыг даван туулдаг;
Олон үе шаттай цэвэршүүлэх процессыг бий болгосноор протеиназа К-ийн эзэн цитохром болон нуклейн хүчлийн үлдэгдлийг стандарт хэмжээнээс доогуур амжилттай устгасан;
Хамгаалалтын буферийн найрлагад өндөр хүчин чадалтай скрининг хийх замаар протеиназа К-ийг 37 хэмд тогтвортой хадгалах буферийг сонгосон;
Скрининг буфер нь протеиназа К-ийг өндөр концентрацитай нэгтгэж, тунадасжуулахад хялбар байдаг гэсэн асуудлыг даван туулж, протеиназа К-ийн хатуу агууламж өндөртэй хөлдөөж хатаах үндэс суурийг тавьдаг.
XD BIOCHEM протеиназа K дээж
XD BIOCHEM протеиназа К-ийн тогтвортой байдлын тест: өрөөний температурт 80 хоногийн дараа идэвхжилд мэдэгдэхүйц өөрчлөлт гарахгүй.
XD BIOCHEM протеиназа К-ийн тогтвортой байдлын тест: өрөөний температурт 80 хоногийн дараа идэвхжилд мэдэгдэхүйц өөрчлөлт гарахгүй.
XD BIOCHEM протеиназа К болон өрсөлдөгч бүтээгдэхүүнүүдийн нуклейн хүчлийн хандыг харьцуулах.Нуклейн хүчлийг гаргаж авах явцад XD BIOCHEM болон өрсөлдөх чадвартай протеиназа К-ийг тус тус ашигладаг.XD BIOCHEM протеиназа К-ийн олборлолтын үр ашиг өндөр, зорилтот генийн Ct утга бага байна.
Шуудангийн цаг: 2021 оны 12-р сарын 31