L-Proline Cas: 147-85-3 99% Цагаан нунтаг
| Каталогийн дугаар | XD90293 |
| Бүтээгдэхүүний нэр | L-Proline |
| CAS | 147-85-3 |
| Молекулын томъёо | C5H9NO2 |
| Молекулын жин | 115.13046 |
| Хадгалалтын дэлгэрэнгүй мэдээлэл | Хүрээлэн буй орчин |
| Тохиромжтой тарифын код | 29339980 |
Бүтээгдэхүүний үзүүлэлт
| Шинжилгээ | 99% мин |
| Гадаад төрх | Цагаан нунтаг |
| Тодорхой эргэлт | -84.5-аас -86 |
| Хүнд металлууд | <15ppm |
| AS | <1ppm |
| Ph | 5.9 - 6.9 |
| SO4 | <0.050% |
| Fe | <30ppm |
| Хатаах үеийн алдагдал | <0.3% |
| Гал асаах үеийн үлдэгдэл | <0.10% |
| NH4 | <0.02% |
| Cl | <0.050% |
| Шийдлийн төлөв | >98% |
Бичил биетний бодисын солилцоог ойлгох нь бүхэл эсэд суурилсан биокаталитик процессыг хөгжүүлэх, оновчтой болгоход зайлшгүй шаардлагатай бөгөөд энэ нь үйлдвэрлэлийн үр ашгийг тодорхойлдог.Энэ нь ялангуяа кофактор/косубстратын эд эсийн нөхөн төлжих чадварын улмаас бодисын солилцооны идэвхтэй эсүүд ажилладаг редокс биокатализын хувьд үнэн юм.Рекомбинант Escherichia coli нь пролин-4-гидроксилазыг (P4H) хэт их үйлдвэрлэхэд ашигласан бөгөөд энэ нь чөлөөт L-пролиныг косубстрат болгон a-ketoglutarate (a-KG) болгон транс-4-гидрокси-L-пролин болгон гидроксилжүүлдэг диоксигеназа юм.Энэхүү бүхэл эсийн биокатализаторын төв нүүрстөрөгчийн солилцоо нь шаардлагатай косубстрат a-KG-ийг хангаж, P4H биокаталитик гүйцэтгэлийг нүүрстөрөгчийн солилцоо, бодисын солилцооны үйл ажиллагаатай шууд холбодог.Бодисын солилцооны инженерчлэл ба (13)C-бодисын солилцооны урсгалын шинжилгээ ((13)C-MFA) зэрэг туршилтын болон тооцооллын биологийн хэрэгслийг ашигласнаар бид бүхэл эсийн биокатализаторын физиологи, бодисын солилцоо, биоэнергийн хариу урвалыг судалж, тоон байдлаар тодорхойлсон. Зорилтот био хувиргалт руу чиглүүлж, цаашдын оновчтой зам инженерчлэлийн хувьд бодисын солилцооны болзошгүй саад бэрхшээлийг тодорхойлсон. Пролин дегидрогеназыг кодлодог putA генийг устгаснаар пролиний задралын дутагдалтай E. coli омгийг бүтээсэн.Энэхүү мутант омгийн бүхэл эсийн биотрансформаци нь зөвхөн тоон пролиний гидроксилжилтийг бий болгоод зогсохгүй, зэрлэг төрөлтэй харьцуулахад транс-4-L-гидроксипролин (гип) үүсэх өвөрмөц хурдыг хоёр дахин нэмэгдүүлэхэд хүргэсэн.Мутантын омгийн төвлөрсөн метаболизмоор дамжин нүүрстөрөгчийн урсгалын дүн шинжилгээ нь P4H-ийн идэвхжилд шаардагдах a-KG-ийн хэрэгцээ нэмэгдсэн нь a-KG үүсгэгч урсгалыг нэмэгдүүлээгүй нь судлагдсан нөхцөлд TCA-ийн хатуу зохицуулалттай циклийн үйл ажиллагааг харуулж байна.Зэрлэг омгийн хувьд P4H синтез ба катализ нь биомассын гарцыг бууруулсан.Сонирхолтой нь, ΔputA омог нь TCA-ийн идэвхийг нэмэгдүүлэхийн оронд харьцангуй бага глюкозын шингээлтийн хурдаар засвар үйлчилгээ хийх эрчим хүчний хэрэгцээг бууруулж, холбогдох ATP болон NADH алдагдлыг нөхөж өгсөн. Рекомбинант E. coli BL21(DE3)(pLysS) дахь putA-ийн уналт нь дараах байдалтай байна. Энэ нь зөвхөн биотрансформацийн гарцын хувьд төдийгүй биотрансформаци, пролиныг шингээх хувь хэмжээ, эрчим хүчний эх үүсвэр дэх hyp-ийн гарцын хувьд үр бүтээлтэй P4H катализ хийх ирээдүйтэй байх болно.Үр дүн нь putA-г тасалсны дараа a-KG-ийн косубстратаар дамжуулан TCA-цикл болон пролин гидроксилжилтийг холбох нь a-KG-аас хамааралтай биотрансформацийн үр ашгийг цаашид сайжруулахад саад болох гол хүчин зүйл болж байгааг харуулж байна.
