Бүтээгдэхүүн

1. Метаболитийн профайлыг тодорхойлох аргууд нь биологийн систем дэх метаболитын санг хэмжих чухал хэрэгсэл юм.Ихэнх метаболитын профайлыг тодорхойлох аргууд нь харьцангуй эрчмийг илтгэдэг эсвэл бүх метаболитыг төлөөлдөг цөөн хэдэн дотоод стандартаас хамаардаг боловч биологийн эс, шингэн дэх метаболитын сангийн тоон тодорхойлолтод тавигдах эцсийн шаардлага бол үнэмлэхүй концентрацийг тодорхойлох явдал юм.Бид илэрсэн бүх метаболитыг үнэмлэхүй тоогоор тодорхойлох боломжийг олгодог өндөр хүчин чадалтай, мэдрэмтгий хийн хроматографи/тандем масс спектрометрийн (GC/MS/MS) зорилтот метаболитын профайлыг тодорхойлох аргыг энд мэдээлэв.Энэ арга нь метил хлороформатын дериватив болон дитератжуулсан дериватив урвалжаар тусад нь гаргаж авсан метаболитын стандарт бүхий дээжийг тоолоход суурилдаг.Уламжлалт электрон нөлөөллийн иончлолыг эерэг химийн ионжуулалтаар сольсон тул сүүлийнх нь молекулын ион болон бусад өндөр молекул жинтэй хэсгүүдийг илүү их хэмжээгээр хадгалдаг.Энэ нь олон төрлийн метаболитуудын дунд MS/MS-ийн өвөрмөц шилжилтийг сонгоход хялбар болгосон.Одоогийн байдлаар шинэ GC/MS/MS арга нь 67 нийтлэг анхдагч метаболитуудаас бүрддэг бөгөөд тэдгээрийн ихэнх нь амин болон амин бус органик хүчлүүдийн бүлэгт багтдаг.Бид шээс, ийлдсийн дээжинд энэ аргыг хэрэглэх боломжтойг харуулж байна.Энэхүү арга нь амин хүчлүүд болон амин бус органик хүчлүүдийн GC/MS метаболитийн тоон профайлыг тодорхойлох өнөөгийн аргачлалыг ихээхэн сайжруулсан арга юм.

2.24S-гидроксихолестерол (24OHC) ба 27-гидроксихолестерол (27OHC) нь өөр өөр гарал үүсэлтэй, бүтцийн хувьд ижил төстэй хоёр оксистерол бөгөөд эхнийх нь бараг зөвхөн тархинд үүсдэг ба сүүлийнх нь бусад эрхтнүүдтэй харьцуулахад тархинд бага хэмжээгээр үүсдэг.ШИНЖҮҮЛЭХ ТААМАГЛАЛ: Мэдрэлийн гэмтэл ба/эсвэл демиелинизаци нь тархинаас тархи нугасны шингэн (CSF) руу 24OHC-ийн урсгалыг ихэсгэдэг бол цус-тархины саад бэрхшээл нь цусны эргэлтээс CSF руу 27OHC-ийн урсгалыг ихэсгэхэд хүргэдэг.Изотопын шингэрүүлэлтийн масс Мэдрэлийн болон хөгшрөлтийн янз бүрийн өвчтэй 250 гаруй өвчтөний цусны сийвэн болон цусны сийвэн дэх хоёр оксистеролыг тодорхойлохын тулд спектрометрийг ашигласан. Хоёр оксистеролын цусны сийвэнгийн түвшин өөр өөр өвчинд сийвэнгийн түвшингээс хамаагүй илүү нөлөөлсөн.Идэвхтэй демиелинизаци өвчтэй өвчтөнүүдэд 24OHC/27OHC харьцаа харьцангуй өндөр байхад CSF-д 24OHC-ийн түвшин нэмэгдсэн байна.Менингиттэй өвчтөнүүд ерөнхийдөө 24OHC/27OHC харьцаа багатай хоёр стероидын өндөр түвшинтэй байсан.Альцгеймерийн өвчтэй өвчтөнүүдийн CSF дахь 24OHC-ийн түвшин бага зэрэг нэмэгдэж, 27OHC бага зэрэг нэмэгдсэн байна.Олон склерозтой өвчтөнүүд 24OHC/27OHC харьцаа өндөртэй идэвхтэй үед 24OHC-ийн түвшин өндөр байх хандлагатай байсан. CSF болон сийвэн дэх хоёр оксистеролыг хэмжих нь мэдрэлийн өвчнийг үнэлэх биохимийн аргуудад ихээхэн нэмэр болно.