Бүтээгдэхүүн

Флуоресцеин ба флуоресцеин метил эфирийн моногалактопиранозидууд: нийлэгжилт, биотнилжүүлсэн β-галактозидазын ферментийн гидролиз, орчуулгын тархалтын коэффициентийг тодорхойлох.

Ацетобромоглюкоз/галактоз ба флуоресцеины метил эфирээс флуоресцеины моногликозид (d-галактопиранозид (FMG) ба d-глюкопиранозид) болон тэдгээрийн метил эфир (MFMG)-ийг сайн үр дүнтэйгээр бэлтгэсэн.Галакто деривативуудын ферментийн гидролизийн туршилтыг (биотинжүүлсэн β-галактозидазыг ашиглан) хийж, кинетик параметрүүдийг тооцоолсон.Гидролизийн явцад флюресценцийн эрчим 15-20 дахин нэмэгдсэн нь ажиглагдсан.Богино хугацаанд, субстратын бага концентрацитай флюресценцийн шугаман өсөлт ажиглагдаж байгаа нь эдгээр нэгдлүүдийг галактозидазын хувьд ашигтай, мэдрэмтгий болгодог.MFMG-ийн Михаэлис-Ментен тогтмол (Км) утгын хэмжээ нь FMG-ээс өндөр байгаа нь флюрогенийн субстратын бүтцийн өөрчлөлтийг харуулж байна.FMG бүхий биотинжүүлсэн β-Галын км-ийн утга нь уугуул ферментийнхээс бага байна.Энэхүү ажиглалт нь биотинжуулсан ферментийн субстратын хамаарал нь уугуул ферменттэй харьцуулахад өндөр байгааг харуулж байна.Флюресценцийн корреляцийн спектроскопи ашиглан флюрогенийн субстрат болон бүтээгдэхүүний аль алинд нь орчуулгын тархалтын коэффициентийг хэмжсэн.Флюрогенийн субстрат ба ферментийн гидролизийн бүтээгдэхүүний орчуулгын тархалтын коэффициентийг 3.5–4.5 × 10−10 м2 с−1-ийн хүрээнд ижил төстэй хэмжсэн.Тиймээс субстрат ба бүтээгдэхүүний хөрвүүлэлтийн хөдөлгөөний ялгаанаас болж ферментийн кинетикийг сайжруулах эсвэл удаашруулах нь тийм ч тодорхой биш юм.