Бүтээгдэхүүн

Колицин E1 сувгийн домэйны мембраны топологийг флюресцент резонансын энергийн дамжуулалт (FRET) аргаар судалсан.FRET нь генетикийн хувьд кодлогдсон флюресцент амин хүчлийг (кумарин) хандивлагчаар, сонгомол шошготой цистеины үлдэгдлийг FRET хүлээн авагчаар DABMI (4-(диметиламино)фенилазофенил-4'-малеймид) холбосон.Флюресцент кумарины үлдэгдэл нь ортогональ тРНХ/аминоацил-тРНХ синтетаза хосоор дамжин уурагт орсон бөгөөд энэ нь колицины сувгийн домэйн доторх дурын сайтад сонгон нэвтрүүлэх боломжийг олгосон.Хувилбар бүр нь кумариныг нэгтгэх зогсолт (TAG) мутаци, DABMI хавсралтад зориулсан цистеины (TGT) мутацыг агуулдаг.1-6-р мушгиа доторх зургаан мушгиа хоорондын зайг FRET шинжилгээг ашиглан уусдаг болон мембрантай холбогдсон төлөвийн аль алинд нь тодорхойлсон.FRET-ийн өгөгдөл нь мембрантай холбоотой 3-6-р мушгиа хоорондын зайд их хэмжээний өөрчлөлт гарсныг харуулсан бөгөөд сувгийн домайны мембрантай холбоотой бүтцийн талаар шинэ ойлголттой болсон.Ерөнхийдөө кумарин-DABMI FRET-ийн спираль хоорондын үр ашиг нь мембраныг холбосноор буурч, колицины сувгийн шүхэр загвар дээр суурилдаг.Одоогийн болон өмнө нь нийтлэгдсэн FRET өгөгдөл дээр үндэслэн сувгийн домэйны хаалттай төлөвийн урьдчилсан загварыг боловсруулсан.Загвар нь 1-7-р мушгиауудыг эсийн гадна талаас цагийн зүүний дагуу дугуй хэлбэртэй байрлуулж, 8, 9-р мушгиагаар үүссэн төв трансмембран үсний хавчаарыг тойруулан 1, 6, 7, 10-р мушгиа хоорондын мембран хоорондын холбоог санал болгож байна.