Бүтээгдэхүүн

ДНХ-ийн суурийн исэлдэлтийн гэмтэл нь ихэвчлэн исэлдсэн пурин, ялангуяа 7,8-дигидро-8-оксогуанин (8-оксоГ) ба 7,8-дигидро-8-оксоаденин (8-оксоА) үүсдэг ба эхнийх нь мэдэгдэж байгаа мутагений гэмтэл.8-oxoG нь ердийн суурьтай харьцуулахад цаашдын исэлдэлтэд амархан өртдөг тул 8-oxoG-ийн исэлдсэн хэлбэрийн эсрэг ДНХ-ийн синтезийн явцад суурь оруулахыг in vitro-д судалсан.Ганц 8-oxoG гэмтэл агуулсан синтетик загварыг эхлээд өөр өөр нэг электрон исэлдүүлэгчээр эсвэл ганц хүчилтөрөгчийн нөхцөлд эмчилж, дараа нь Кленов фрагментийн экзо- (Kf экзо-), тугалын тимус ДНХ полимераза альфа (пол альфа) -аар катализлагдсан праймер өргөтгөлөөр хийсэн. ) эсвэл хүний ​​ДНХ полимераз бета (пол бета).Өмнөх мэдээллүүдийн дагуу dAMP болон dCMP-ийг бүх гурван ДНХ полимераз бүхий 8-oxoG-ийн эсрэг сонгон оруулав.Сонирхолтой нь, 8-oxoG-ийн исэлдэлт нь өөрчлөгдсөн суурийн талбайд үүсэх праймерын өргөтгөлийг түр зуур дарангуйлж, Kf exo-ээр гэмтлийн эсрэг талд dAMP болон dGMP оруулдаг болохыг тогтоожээ.Цаашилбал, гэмтэл нь пол альфа ба пол бета-ийн ДНХ-ийн нийлэгжилтийн үед блок үүсгэдэг.8-оксоА-өөр өөрчилсөн загвар олигонуклеотидын туршилтууд нь 8-оксоА ба исэлдсэн 8-оксоА хэлбэрийн аль аль нь dTMP-ийг Kf exo-ээр шууд оруулдаг болохыг харуулж байна.8-oxoG агуулсан олигонуклеотидын IrCl62-тэй исэлдэхээс өмнө болон дараа нь масс спектрометрийн шинжилгээ нь үндсэн бүтээгдэхүүн болох 8-oxoG сайтын исэлдэлттэй нийцэж байгаа бөгөөд үүний үр дүнд гол бүтээгдэхүүн болох гуандинохидантоины хэсэг үүсдэг.Абазик сайтууд үүссэнийг нотлох баримт олдсонгүй.Эдгээр үр дүн нь 8-oxoG-ийн исэлдсэн хэлбэр, магадгүй гуанидинохидантоин нь ДНХ-ийн синтезийн явцад dNTP-ийг буруу уншиж, буруу оруулахад хүргэдэг болохыг харуулж байна.Хэрэв ийм процесс in vivo явагдсан бол энэ нь G-->T ба G-->C хөрвүүлэлтэд хүргэдэг цэгийн мутагений гэмтэлийг илэрхийлнэ.Гэсэн хэдий ч 8-oxoA-ийн харгалзах исэлдсэн хэлбэр нь Kf экзо-тэй ДНХ-ийн нийлэгжилтийн үед Т-ийн зөв оруулгыг харуулдаг.